細(xì)胞名稱LoVo（人結(jié)腸癌細(xì)胞）

　　種屬人

　　年齡（性別）男；56歲

　　組織來源直結(jié)腸腺癌，轉(zhuǎn)移位置：左鎖骨上區(qū)

　　生長特性貼壁

　　細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣

　　背景描述LoVo細(xì)胞是于1971年從診斷為結(jié)腸腺癌的56歲男性白人的一個(gè)轉(zhuǎn)移到左鎖骨上區(qū)的腫瘤結(jié)節(jié)建系而來。癌基因檢測表明，LoVo細(xì)胞C-myc、K-ras、H-ras、N-ras、Myb、sis和fos的表達(dá)呈陽性；癌基因N-myc的表達(dá)未做檢測。LoVo細(xì)胞在裸鼠中能成瘤，與107細(xì)胞聯(lián)合皮下接種5只裸鼠21天后全部成瘤。LoVo表達(dá)腫瘤特異的核基質(zhì)蛋白蛋白CC-3和CC-4。

　　生長培養(yǎng)基Ham's F-12K＋10%FBS＋1%P/S

　　培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%溫度：37℃

　　LoVo（人結(jié)腸癌細(xì)胞）保種心得：

　　首先，細(xì)胞采購的運(yùn)輸形式一般分為兩種，一種是直接寄送凍存細(xì)胞，一種是復(fù)蘇后寄送活細(xì)胞。前者是由液氮中取出細(xì)胞凍存管，采用干冰運(yùn)輸；后者是將細(xì)胞復(fù)蘇至T-25培養(yǎng)瓶中，采用常溫運(yùn)輸。兩者各有優(yōu)缺點(diǎn)，第,一種方式的優(yōu)點(diǎn)是可以長途運(yùn)輸，因?yàn)榧?xì)胞在干冰中相對穩(wěn)定，一般可以保證數(shù)周之內(nèi)不影響細(xì)胞活性，但缺點(diǎn)是運(yùn)輸成本高，且細(xì)胞復(fù)蘇是很復(fù)雜的過程，如果細(xì)胞復(fù)蘇后狀態(tài)不佳，則很難界定是來源的問題還是復(fù)蘇操作的問題；而第二種方式的優(yōu)點(diǎn)是細(xì)胞收到后可以直接通過觀察來大體了解細(xì)胞狀態(tài)，并且對運(yùn)輸?shù)囊笙鄬^低，缺點(diǎn)則是只適合短途運(yùn)輸，因?yàn)榧幢氵\(yùn)輸時(shí)培養(yǎng)基中不添加血清，細(xì)胞還是會不斷增殖，當(dāng)細(xì)胞長滿后，細(xì)胞的狀態(tài)會隨時(shí)間的增加而不斷變差。綜上，如果是從國外大型細(xì)胞庫采購，一般采用第,一種方法，既能適應(yīng)長途運(yùn)輸，且大型細(xì)胞庫的凍存細(xì)胞質(zhì)量普遍較好，在良好的操作下復(fù)蘇成活率很高；如果是從國內(nèi)細(xì)胞庫采購，則一般采用第二種方法，方便收到細(xì)胞時(shí)能較好掌握細(xì)胞狀態(tài)，并且降低運(yùn)輸成本。

　　LoVo（人結(jié)腸癌細(xì)胞）分別針對兩種運(yùn)輸方式來談下對新細(xì)胞的處理過程：

　　對于直接寄送凍存細(xì)胞的情況，首先要檢查的就是細(xì)胞收到后是否有足量剩余干冰，如果干冰不足，或是已經(jīng)沒有干冰，則細(xì)胞狀態(tài)可能會收到影響，建議盡快復(fù)蘇；如果有足量干冰，建議先轉(zhuǎn)移至-80℃冰箱過夜，于第二天按正常流程復(fù)蘇，即37℃水浴鍋中快速融解，低速離心后去除含DMSO的凍存液，換入適合細(xì)胞的新鮮培養(yǎng)基，輕柔吹勻后轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)皿中，補(bǔ)足培養(yǎng)基；一般貼壁細(xì)胞在24h內(nèi)即可觀察到細(xì)胞貼壁，從而判斷細(xì)胞狀態(tài)，懸浮細(xì)胞則復(fù)蘇后即可觀察細(xì)胞狀態(tài)。對于凍存時(shí)間較長的細(xì)胞，可能需要傳代1到2次后，細(xì)胞才會調(diào)整到正常狀態(tài)，所以細(xì)胞復(fù)蘇后如果狀態(tài)不佳，不要灰心，仍要細(xì)心培養(yǎng)。