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更新日期2025-07-08 08:49
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GelRed
GelRed是一種結(jié)合于所有dsDNA雙螺旋小溝區(qū)域的具有*設(shè)計(jì)的熒光染料,熒光信號(hào)強(qiáng)度與雙鏈DNA的數(shù)量相關(guān),與化乙錠(EB)有相同的光譜特性,使用觀察EB的普通紫外凝膠透射儀觀察即可,染色后的DNA條帶在紫外光透射下呈現(xiàn)紅色熒光。這種新型染料具有不能穿透細(xì)胞膜、與雙鏈DNA的結(jié)合力非常強(qiáng),基因誘變性低,熱穩(wěn)定性高,對(duì)分子生物學(xué)中常用的酶沒(méi)有抑制作用及適用范圍廣等優(yōu)點(diǎn),得到了市場(chǎng)的廣泛認(rèn)可。該產(chǎn)品適用于瓊脂糖和聚丙烯an凝膠電泳中的dsDNA、ssDNA及RNA染色。
使用方法
膠染法(使用方法同EB,電泳前膠染色)
(1)制膠時(shí)按1:10000比例加入GelRed核酸染料(例如:每50 mL瓊脂糖溶液中加入5μL GelRed 10,000×儲(chǔ)液)。由于GelRed具有良好的熱穩(wěn)定性,可以在熱的瓊脂糖溶液中直接添加,而不需要等待溶液冷卻。搖晃,振蕩或者翻轉(zhuǎn)以保證染料充分混勻。此方法不適合預(yù)制聚丙凝膠。
(2)按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳。
2.泡染法(電泳后膠染色)
(1)按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳后,將凝膠小心地放入合適的容器中,緩慢加入足量的3×染色液(用0.1 M NaCl溶液稀釋GelRed染液3300倍形成3×染色液,如將15μL GelRed 10,000×儲(chǔ)液加入到50 mL 0.1 M NaCl溶液,該染色液可重復(fù)使用3次,4℃(室溫)避光保存1周)浸沒(méi)凝膠。
(2)室溫振蕩染色30 min左右,輕輕搖晃,染色時(shí)間根據(jù)凝膠厚度以及瓊脂糖濃度不同而略有不同。對(duì)于含3.5~10%丙烯的凝膠,染色時(shí)間通常介于30 min到1 h,并隨丙烯含量增加而延長(zhǎng)。
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